CIK细胞培养程序

1. 将分离机采集细胞缓慢加在细胞分离液（1.077 g/ml）上，体积比为1:1，800?g，室温离心20分钟；

2. 收集界面的白色絮状细胞加入30ml的低糖DMEM培养基，轻轻吹打混匀，300?g，室温离心10分钟；

3. 重复离心洗涤共3遍；

4. 收取细胞轻轻吹打混匀，加入无血清培养基及IFN-γ500 U/ml置37℃、5% CO2孵箱中培养；

5. 24 h后加入IL-2 300 U/ml，CD3 10 ng/ml，IL-1 100 U/ml 继续培养，；

6. 每天观察细胞生长状态并根据情况进行换液及加入IL-2 300 U/ml进行扩增；

7. 细胞收集：第14-20天收集细胞，离心弃上清液，用生理盐水洗涤细胞2 次以上，重新混匀，悬于100～200 ml 输注用生理盐水中。

附件30-32

治疗方案制定

从理论上来说，几乎每一位肿瘤病人都可以从免疫治疗中获得益处。早期肿瘤病人由于机体免疫系统尚未受到肿瘤的严重影响，对免疫治疗的应答较好，疗效相对也会更好。CIK 细胞对多种实体肿瘤均有明显疗效，对白血病也有很好作用，尤其是骨髓移植或化疗缓解后能够清除残存的肿瘤细胞，防止复发。CIK 细胞治疗肿瘤的疗效除与输注细胞数量及活性有明显关系外，还与患者的选择有很大关系。

适应证

CIK 细胞可用于下述肿瘤患者的辅助治疗：

1）手术后患者，可防止肿瘤转移、复发；